Приборы для количественного и качественного анализа методом ТСХ

 Приборы для количественного и качественного анализа методом тонкослойной хроматографии

Количественный вариант тонкослойной хроматографии предъявляет повышенные метрологические требования ко всем стадиям анализа. Особенно велик вклад погрешностей, возникающих при нанесении пробы на пластину. Здесь приходится решать две задачи: правильно разместить на пластине максимальное число стартовых пятен и добиться минимального их размера. Диаметры стартовых пятен, нанесенных вручную, неизбежно имеют большой разброс, а это ухудшает качество разделения и искажает градуировочную кривую. Необходимую точность нанесения пятен и минимизацию их диаметра обеспечивают механические и автоматические аппликаторы.

Механические аппликаторы являются полуавтоматическими приборами. Погрешность, вносимая оператором, мала, но все же присутствует. Полностью автоматические аппликаторы, управляемые с помощью встроенного микропроцессора или компьютера, не требуют специального наблюдения после задания программы. Их отличает высокая точность нанесения пробы и воспроизводимость результатов.

Следующей очень важной операцией, существенно влияющей на количественные результаты тонкослойной хроматографии, является визуализация разделенных при элюировании пятен. Для детектирования веществ по флуоресценции или поглощению УФ излучения на пластинах с УФ-индикатором применяются облучатели, работающие на длинах волн 254 и 365 нм. Современные хроматографические облучатели, как правило, работают на обеих длинах волн. Они монтируются в открытом или в закрытом корпусе. Наибольшей универсальностью обладает закрытая камера, не требующая для наблюдения затемненного помещения.

В тонкослойной хроматографии применяется два принципиально различных метода количественной оценки: прямой — непосредственно на пластинах и косвенный — удаление разделенных веществ с пластин и анализ подходящими физико-химическими методами. К прямым методам измерения относится денситометрия. Она базируется на том положении, что размер и интенсивность окраски пятна есть функция количества вещества в пятне.

Уже в 1970-е годы существовало порядка 15-ти моделей механических денситометров, производивших прямую фотометрическую оценку хроматограммы. В конструктивном отношении все они представляют собой типичные спектрометры, в которых перемещающуюся хроматографическую пластину сканирует узкий луч света с определенной длиной волны. При такой схеме измерения требуется значительное время, а из-за сложности оптико-механической системы стоимость этих денситометров высокая.

Создание видеоденситометра, использующего для количественных расчетов видеоизображения хроматограмм, значительно ускорило процесс анализа. Кроме того, этот прибор позволяет сохранять данные для последующей обработки и облегчает документирование. Основным его преимуществом является высокая скорость обработки. Если съемка и расчет параметров пятен на пластине с помощью механического денситометра длится до 30 мин, то на видеоденситометре та же процедура занимает 2—3 мин, поскольку хроматограмма обрабатывается как единое целое. В свою очередь это требует равномерного освещения пластины, что представляет собой достаточно сложную инженерную задачу. Поскольку видеоденситометр состоит, в принципе, из устройств, обеспечивающих получение и обработку изображения, стоимость его как минимум вдвое ниже, чем механического денситометра.

Цветная видеокамера передает изображение через блок ввода на компьютер. Для пластин с окрашенными в видимом свете пятнами (в том числе и после обработки проявляющими веществами) предусмотрено получение изображений с помощью планшетного сканера, что значительно расширяет возможности видеоденситометра. Специальная программа позволяет по изображениям хроматограммы расчет состава веществ в смеси и концентрации вещества в пробе. Воспроизводимость измерений составляет 98% при относительном среднеквадратичном отклонении площади хроматографических зон менее 4%. Применение программных средств уменьшает трудоемкость расчета и снижает погрешность результатов анализа, создает возможность собрать банк сравнительных данных проведенных анализов. Результаты расчетов — графики, таблицы, текстовые пояснения, а также цветное изображение хроматограммы могут быть сохранены и отпечатаны в виде отчета.

Настоящий прайс-лист является сокращенным.

В случае Вашей заинтересованности, запрашивайте у нас дополнительную информацию.